新(xīn)聞中(zhōng)心
紫外-可(kě)見(UV-Vis)分(fēn)光光度計通過測量紫外和可(kě)見光波段的光吸收對樣品進行定量和鑒定。分(fēn)光光度計的曆史前身可(kě)以追溯到1814年,當時約瑟夫·馮·弗勞恩霍夫(Joseph von Fraunhofer)(弗勞恩霍夫應用(yòng)研究促進協會的贊助人)利用(yòng)自己發明的分(fēn)光光度計測量太陽光并發現太陽光譜中(zhōng)的574條暗譜線(xiàn)(弗勞恩霍夫線(xiàn))。
而一台商(shāng)用(yòng)紫外-可(kě)見分(fēn)光光度計是阿諾德(dé)·貝克曼在1941年推出的,該儀器利用(yòng)石英棱鏡将鎢燈發出的光分(fēn)離為(wèi)吸收光譜,并利用(yòng)光電(diàn)管(光電(diàn)二極管的前身)記錄信号。為(wèi)了說明光源和電(diàn)子設備的背景影響,紫外-可(kě)見分(fēn)光光度計測量通過樣品的光的強度,并自動減去背景,以提供代表樣品測定特性的精(jīng)确讀數。
分(fēn)光光度計發展到今天,已成為(wèi)生命科(kē)學(xué)、醫(yī)藥科(kē)學(xué)、分(fēn)析化學(xué)等領域重要的儀器。而超微量分(fēn)光光度計的出現,讓分(fēn)析所需的樣品量降低至微升級别,特别适合于生命科(kē)學(xué)珍貴樣品的的定量分(fēn)析。Implen于2005年推出的Label Guard超微量比色皿,使任何用(yòng)戶都可(kě)以在常規紫外分(fēn)光光度計上進行微量樣品測量,而2006上市的Nanophotometer®系列超微量分(fēn)光光度計,标志(zhì)了“後分(fēn)光“時代的開始。
微量紫外-可(kě)見分(fēn)光光度計與常規的分(fēn)光光度計相比,有(yǒu)着不同的設備結構,其特性是能(néng)夠于獲得全光譜分(fēn)析結果,使得核酸、蛋白質(zhì)等樣品可(kě)被定量及分(fēn)析。常規分(fēn)光光度計常采用(yòng)前置分(fēn)光器(如光栅),使光源發出的複色光分(fēn)光為(wèi)單色光,這能(néng)夠讓入射光保持很(hěn)好的單色性,單色光穿過樣品池産(chǎn)生吸收,由二極管或倍增管檢測器檢測光強度。當光栅進行轉動時,就會有(yǒu)不同波長(cháng)的單色光逐一通過樣品池,這時就可(kě)進行光譜掃描測量。
雖然在靈敏度、噪音、雜散光等方面具(jù)備優勢,但光譜掃描所需的時間往往是較長(cháng)的,這并不太适合于生命科(kē)學(xué)樣品的定量及光譜分(fēn)析。因此,目前市面上大多(duō)數的用(yòng)于測量生命科(kē)學(xué)樣品的微量分(fēn)光光度計采用(yòng)的是相反的光學(xué)結構,即“後分(fēn)光”形式。
由氙燈光源發出的複色光,通過樣品(微量或比色皿樣品),在相應的波長(cháng)下分(fēn)别産(chǎn)生吸收,減弱的複色出射光通過分(fēn)光器進行分(fēn)光,後由陣列式檢測器同時檢測所有(yǒu)波長(cháng)對應的吸光值。陣列式檢測器通常為(wèi)CCD,為(wèi)長(cháng)條形結構,每個像元組能(néng)夠精(jīng)确的檢測對應的波長(cháng)。因此,嚴謹的說,微量分(fēn)光光度計的全光譜測量,是無需“掃描“的”,而是同時獲得的。
因此,微量分(fēn)光光度計的核心部件中(zhōng),氙燈替代了鎢燈氘燈組,後分(fēn)光結構替代了前分(fēn)光結構,陣列式CCD檢測器替代了光電(diàn)二極管檢測器。在同時,也完全能(néng)夠滿足樣品測量準确性的要求,可(kě)謂是為(wèi)大分(fēn)子定量分(fēn)析量身定制的儀器。而Nanophotometer®出衆的全光譜測量性能(néng),也廣泛應用(yòng)于分(fēn)析化學(xué)領域。
後分(fēn)光的結構還有(yǒu)其優勢,由于分(fēn)光器是固定的,無需轉動進行光譜掃描,因此波長(cháng)的穩定性是非常好的。而掃描式分(fēn)光光度計必須考慮分(fēn)光器轉動導緻的波長(cháng)漂移問題,需要定期檢測或調整。在後面幾期我們将介紹儀器的檢定問題,會具(jù)體(tǐ)介紹。
無論是前分(fēn)光,還是後分(fēn)光,都各具(jù)特點,也适合于不同的應用(yòng)需求。充分(fēn)的了解構造和原理(lǐ),有(yǒu)助于您合理(lǐ)的選擇和正确的使用(yòng)儀器。德(dé)國(guó)Implen 18年來一直專注于微量樣品吸光度測量領域,我們以豐富的制造和應用(yòng)經驗為(wèi)用(yòng)戶提供有(yǒu)效的産(chǎn)品,也熱衷于分(fēn)享知識與傳遞價值。Implen是值得您信賴的超微量品牌。