超微量分(fēn)光光度計作(zuò)為(wèi)常用(yòng)的核酸、蛋白等生物(wù)大分(fēn)子的定量和表征工(gōng)具(jù)，廣泛應用(yòng)于生命科(kē)學(xué)和生物(wù)制藥等領域，用(yòng)戶僅需微量樣品即可(kě)獲得濃度及吸光度結果。然而在日常使用(yòng)中(zhōng)，一些用(yòng)戶會對測量結果有(yǒu)疑慮，尤其是當測量結果與預估的結果出現較大差異，或與使用(yòng)其他(tā)方法的定量結果有(yǒu)差異時，用(yòng)戶往往會懷疑設備出現問題或故障。

實際上，作(zuò)為(wèi)精(jīng)密的分(fēn)析儀器，設備出現問題的幾率并不高，尤其是當設備正常使用(yòng)和日常維護時，更多(duō)的問題可(kě)能(néng)由外部因素導緻，如樣品的均質(zhì)、顆粒物(wù)或氣泡幹擾等。本文(wén)提所列的方法可(kě)幫助您判定設備的狀态，以便您放心的進行測量工(gōng)作(zuò)。

标準品測量

常用(yòng)的标準品可(kě)使用(yòng)BSA或核酸标準品，可(kě)從各試劑廠家購(gòu)買，或使用(yòng)如BCA定量試劑盒，QUBIT核酸定量試劑盒中(zhōng)的标準品。請注意标準品要在效期之内，且保存得當（通常低溫）。也可(kě)以使用(yòng)設備廠家提供的小(xiǎo)分(fēn)子化合物(wù)标準品，如Implen提供的PHP标準品。标準品是有(yǒu)等級區(qū)分(fēn)的，通常附帶有(yǒu)檢定證書的标準品，标稱濃度會更準确。

    特别指出的是，使用(yòng)未知濃度的樣品，來評估不同設備的測量結果，并以其中(zhōng)一台作(zuò)為(wèi)基準，判定另外一台的準确性，是完全錯誤的。

重複性測量

在缺乏标準品，或标準品由于保存不當狀态已存疑時，可(kě)使用(yòng)未知濃度樣品做重複性測試。這可(kě)以判斷設備的穩定性，以排除一些潛在問題，如樣品台損壞、樣品的非均質(zhì)，成分(fēn)幹擾等。雖然不能(néng)确定準确性誤差，但重複性很(hěn)好的設備，很(hěn)大幾率是沒有(yǒu)大問題的。當然，這需要結合您的允差要求，綜合考量。

梯度稀釋測量

使用(yòng)已知濃度或未知濃度的樣品，均可(kě)進行梯度稀釋測量，以驗證設備的線(xiàn)性穩定性。使用(yòng)設備的标準曲線(xiàn)功能(néng)可(kě)便捷地完成此項測試，并給出線(xiàn)性回歸。當梯度稀釋的R2趨近于1，設備的線(xiàn)性完全可(kě)滿足廣泛的動态範圍内的測量要求，同時也可(kě)反映設備的良好狀态。需要注意的是，梯度稀釋時要選擇定期校準過的，準确性好的移液器，且正确操作(zuò)。

基線(xiàn)穩定性測量

光源和CCD檢測器，作(zuò)為(wèi)設備的核心組件，其穩定性對于設備而言是非常重要的，而基線(xiàn)測量可(kě)以很(hěn)好地反映這些部件的狀态。使用(yòng)水（或空氣）作(zuò)為(wèi)空白，并且用(yòng)水（或空氣）作(zuò)為(wèi)樣品，做多(duō)次重複測量，如果吸光值的漂移很(hěn)小(xiǎo)，通常可(kě)反映設備的光學(xué)系統組件狀态正常。

光譜曲線(xiàn)

正常的核酸和蛋白質(zhì)樣品，或者其他(tā)化合物(wù)樣品，都具(jù)有(yǒu)典型的吸收曲線(xiàn)。異常的曲線(xiàn)往往說明樣品的問題，或設備光路系統可(kě)能(néng)存在的問題。光譜曲線(xiàn)可(kě)作(zuò)為(wèi)測量結果可(kě)靠性的參考，且多(duō)數設備可(kě)根據曲線(xiàn)給出樣品潛在問題的警告。

 通過以上測試方法，可(kě)以評估設備的狀态和試驗數據的可(kě)靠性。實際工(gōng)作(zuò)中(zhōng)，由于設備本身原因導緻的測量不準确畢竟是占少數的。規範操作(zuò)，正确使用(yòng)應是用(yòng)戶更應關切的核心。後續，我們将為(wèi)您解讀關于超微量測量樣品時的一些常見誤區(qū)，希望您持續關注，更加惬意地使用(yòng)您的Nanophotometer®。