超微量分(fēn)光光度計是核酸和蛋白(bái)定量的常用工(gōng)具，在日常使用過程中(zhōng)，空白(bái)測量是在樣品測量前所必須的步驟。正确的理解什麽是NanoPhotometer®或任何其他超微量分(fēn)光光度計上的空白(bái)測量，以及空白(bái)讀數對工(gōng)作流程和結果産生(shēng)的影響，是保障儀器正确操作和獲得可靠結果的基礎。

對于雙光束紫外(wài)-可見分(fēn)光光度計而言，空白(bái)與樣品測量在空間上分(fēn)開(kāi)，扣除空白(bái)後得到樣品的吸光值。而超微量分(fēn)光光度計通常采用單光束設計，空白(bái)與樣品測量需要在時間上分(fēn)開(kāi)，在進行空白(bái)測量後，得到表征光源強度的基線，然後樣品的測量值扣除空白(bái)測量值得到樣品的吸光值。在實際測量過程中(zhōng)，在一(yī)次空白(bái)測量之後，隻要樣品的溶劑成分(fēn)不變，可以連續地測量多個樣品，結果的計算都基于初始空白(bái)值的扣除。然而，空白(bái)基線的穩定是否受時間影響呢？即多久做一(yī)次空白(bái)，可以确定樣品的吸光值和濃度準确可靠呢？

由于超微量分(fēn)光光度計通常使用氙閃燈光源，作爲一(yī)種閃爍點亮的冷光源，其穩定性是非常好的，基線的穩定性通常在1小(xiǎo)時内可保持在0.002-0.003A（10mm光程）之内的波動水平，如果将光程因子計算在内，相當于1-2ng/μl dsDNA的濃度水平。對于常規濃度的樣品而言，這個誤差的引入幾乎可以忽略，也不會反映在重複性之上。因此，對于一(yī)般性實驗，在起碼一(yī)小(xiǎo)時内，空白(bái)測量是不用重新進行的（在樣品台清潔的情況下(xià)）。而對于低濃度樣品和一(yī)些流程嚴格控制的實驗而言，基線随時間的波動将引入值得關注的測量不确定度，可能産生(shēng)可觀的示值誤差，但對重複性的影響較小(xiǎo)。因此，對于一(yī)些特殊樣品，空白(bái)測量與樣品測量不宜間隔較長的時間，以減小(xiǎo)風險，甚至可能每個樣品都重新做空白(bái)。

NanoPhotometer®在每次開(kāi)機時都會對光源強度進行檢測，初始化通過即代表光源已進入工(gōng)作狀态。在使用過程中(zhōng)，也可以通過光譜診斷功能，實時地進行光源性能檢查。空白(bái)測量和基線穩定性對于超微量而言是重要的，不少日常使用中(zhōng)出現的問題都源自于空白(bái)和基線漂移。除了設備自身的診斷功能之外(wài)，定期的進行設備的基線穩定性檢查也有助于判斷和基線有關的部件是否正常，如光源、光學路徑和檢測器。

Implen通過樣品壓縮法實現了測量時間的大(dà)幅縮短，使光源的壽命延長至10年以上，在這個基礎上，進一(yī)步增強了光線的強度控制和穩定性。而出色的光學路徑設計和高性能通光材料的使用，也确定了基線波動在很小(xiǎo)的範圍内。在實際使用過程中(zhōng)，用戶根據樣品的實際情況和實驗允差要求，制定合理的空白(bái)測量頻(pín)率，可在确定可靠性的同時提高實驗效率。