新(xīn)聞中(zhōng)心

    細胞計數儀怎麽選?一文(wén)助您徹底擺脫選擇困難症。

    最近有(yǒu)不少小(xiǎo)夥伴咨詢,你們這個SmartCell 600、800和900有(yǒu)什麽區(qū)别?還有(yǒu)更直接的,那台紫色怪好看的,跟阿藍和小(xiǎo)綠有(yǒu)什麽區(qū)别?看似外觀形狀相同,儀器顔色和軟件界面卻有(yǒu)很(hěn)大差别,當然啦,他(tā)們檢測的細胞類型又(yòu)有(yǒu)差異,在各自應用(yòng)領域發光發熱!

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    那麽如何根據自己的需求來選一款稱心如意的細胞計數儀呢(ne)?


    1、測試細胞類型


    在選擇儀器之前,我們首先要思考兩個問題:


    1、自己的細胞房培養哪些細胞?


    一般實驗室細胞房培養的大多(duō)為(wèi)常規傳代培養的細胞系,比如腫瘤細胞、動物(wù)哺乳細胞、昆蟲細胞等,這類細胞直徑範圍在5-40μm。


    還有(yǒu)一些可(kě)能(néng)是從組織或血液分(fēn)離的原代細胞,比如脾細胞、PBMC細胞、臍帶血或骨髓源的原代間充質(zhì)幹細胞等;這類細胞組分(fēn)複雜,可(kě)能(néng)有(yǒu)組織碎片、血小(xiǎo)闆、紅細胞等雜質(zhì)幹擾 。


    最後呢(ne),還有(yǒu)一些老師在某些細分(fēn)領域計數需求,比如酵母細胞、球藻細胞、芽孢杆菌等微生物(wù)小(xiǎo)粒徑細胞(1-10μm),甚至低于1μm 的大腸杆菌 。

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    CHO細胞

    (10-20μm)

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    T細胞

    (6-10μm)

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     酵母細胞

    (2-6μm)

    我們根據培養細胞類型的直徑大小(xiǎo),第一步要确認合适的物(wù)鏡放大倍數,就跟在顯微鏡下有(yǒu)4X、10X、40X和100X不同放大倍數一樣,需要選擇一個正确的物(wù)鏡來滿足成像清晰和識别。正常的細胞系和原代細胞計數儀采用(yòng)5X物(wù)鏡光學(xué)放大就可(kě)滿足,針對酵母和球藻以及一些粒徑更小(xiǎo)的微生物(wù)樣本,需要用(yòng)到10X甚至20X物(wù)鏡才能(néng)夠看的清晰。

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    5倍放大

    酵母細胞

    10倍放大

    酵母細胞

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    2、細胞分(fēn)析是關注細胞活率還隻是細胞濃度?

    細胞計數儀分(fēn)為(wèi)明場款(激發光為(wèi)白光)和熒光款(不同顔色的激發光),其中(zhōng)明場包括非台盼藍染色和台盼藍染色,如果您平時隻關注細胞濃度,這時選一款明場計數儀即可(kě)滿足需求。那如果細胞濃度和細胞活率都關注,我們就需要考慮用(yòng)經典台盼藍染色還是AO(吖啶橙)/PI(碘化丙啶)雙熒光染色分(fēn)析。

    台盼藍和熒光染色比較


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    台盼藍染色

    AO/PI熒光染色

    原理(lǐ)

    細胞膜的通透性

    (非特異性染色)

    核酸染色

    (特異性染色)

    識别區(qū)分(fēn)

    活細胞:不染色

    死細胞:藍色

    活細胞:綠熒光

    死細胞:紅熒光

    适用(yòng)範圍

    常規傳代培養細胞

    細胞系、原代細胞、免疫細胞等

    台盼藍染色

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    AO/PI雙熒光染色

    當然,除了台盼藍和AO/PI雙熒光染色之外,還可(kě)以通過AO/DAPI染色,DAPI染色可(kě)以标記所有(yǒu)細胞核,可(kě)能(néng)在特定條件下染色死細胞。PI相比DAPI染死細胞則更為(wèi)專一,用(yòng)于标記失去膜完整性的死細胞。針對細菌的活率分(fēn)析,還可(kě)以通過SYTO-9/PI染色,SYTO-9是一種能(néng)夠透過細胞膜的綠色熒光核酸染料,可(kě)用(yòng)于細菌的RNA和DNA染色。


    2、測試數據的可(kě)靠性


    在完成第一步選擇後,接下來需要選擇一個檢測數據可(kě)靠的計數儀,無論它功能(néng)多(duō)麽強大,數據可(kě)靠性是關鍵的,它主要體(tǐ)現在測試數據的準确性和穩定性。


    其中(zhōng)準确性是測試值與真實值之間的差異,我們一方面可(kě)以通過與人工(gōng)血球計數對比,相同的一管細胞樣本,通常要求計數儀與人工(gōng)之間的計數誤差在10%以内;另一方面可(kě)以用(yòng)标準品(不同濃度、直徑和活率的标準品)進行驗證;要求更高的用(yòng)戶會請第三方計量公(gōng)司進行再次計量驗證,最後結合自己的細胞進行方法學(xué)驗證,通過以上多(duō)重驗證,最後确定儀器的準确性 。


    其次,穩定性通常我們可(kě)以對同一個樣品進行幾組平行測試,或者對同一個高濃度樣品做梯度稀釋分(fēn)析線(xiàn)性關系,這裏面有(yǒu)一個重要的參數CV值(變異系數),一個可(kě)靠的計數儀,在合适的濃度範圍内,通常CV值<5%。

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    決定一個計數儀數據可(kě)靠性,主要有(yǒu)以下兩個方面:


    硬件 包括光路系統、成像系統,其中(zhōng)成像的像素決定圖片的清晰度,從而影響到識别結果;配置越高,成像越清晰;其次是自動化過程,這裏面包括進樣、對焦、曝光等參數,全自動過程能(néng)減少人為(wèi)操作(zuò)帶來的誤差,從而提高檢測數據的穩定性,

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    低像素,成像模糊

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    高像素,成像清晰

    軟件算法   在獲得一張高質(zhì)量圖片之後,要對其進行算法識别分(fēn)析,目前主要基于兩種算法,一種是基于灰度值(普通算法),另外一種是基于深度學(xué)習人工(gōng)智能(néng)算法(AI算法),這種先進算法相對于普通算法,能(néng)夠對聚團細胞精(jīng)準分(fēn)割,對不規則細胞精(jīng)準識别,對含有(yǒu)細胞碎片、雜質(zhì)等複雜樣本精(jīng)确計數,這種算法能(néng)夠實現不同領域、不用(yòng)應用(yòng)場景的計數分(fēn)析。萌薇生物(wù)也是國(guó)内早期将AI技(jì )術應用(yòng)在細胞計數領域并進行儀器開發的廠家。


    3、檢測效率


    傳統的血球計數法能(néng)夠不斷被智能(néng)細胞計數儀替代,其中(zhōng)檢測效率是一個非常大的因素,如果您每天檢測的細胞樣本量多(duō),檢測效率相當關鍵,一個優秀的計數儀,不僅準和穩,快也很(hěn)重要。檢測效率主要包括以下兩點:


    單個樣品檢測時間:通常檢測一個樣品,人工(gōng)計數時間在3-5分(fēn)鍾,計數儀在10秒(miǎo)到2分(fēn)鍾時間不等,産(chǎn)生差異的原因主要是儀器的自動化程度,尤其是手動進樣和手動調焦會直接影響到計數的效率,其次是算法分(fēn)析的時間也有(yǒu)差異,例如先進的AI算法将直接縮短處理(lǐ)圖片的時間,這也是為(wèi)什麽萌薇計數儀實現測試分(fēn)析速度快的重要原因。

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    計數闆通量:一塊血球計數闆有(yǒu)兩個加樣孔槽,市面上絕大數計數儀也是采用(yòng)兩個通量,當我們樣本量比較多(duō)時,就需要更高通量的計數闆,一次性可(kě)以同時測多(duō)少樣品,這也是決定效率的一個因素。萌薇計數闆采用(yòng)6樣品孔設計,不僅在提高效率的同時,還一定程度降低了測試成本。

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    4、其他(tā)因素


    除了以上三點以外,還有(yǒu)一些其他(tā)因素也得考慮:

    機型--分(fēn)體(tǐ)機還是一體(tǐ)機,主要根據細胞房空間大小(xiǎo)來選擇,分(fēn)體(tǐ)機需要連接電(diàn)腦,一體(tǐ)機則包含顯示屏,可(kě)直接操作(zuò),相對分(fēn)體(tǐ)機價格要高一些,但使用(yòng)起來簡單方便。


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    軟件分(fēn)析功能(néng)--一台優秀的計數儀在完成基本的參數(細胞濃度、活率、直徑、圓度、聚團率)分(fēn)析功能(néng)之後,還要具(jù)備對測試數據的整理(lǐ)和分(fēn)析,包括直徑分(fēn)布圖、測試數據再分(fēn)析、數據對比分(fēn)析(CV值計算)、增殖曲線(xiàn)等分(fēn)析功能(néng);滿足JPG、EXCEL、PDF等多(duō)種格式的數據輸出方式,不僅能(néng)通過U盤輸出還可(kě)以通過服務(wù)器輸出;數據的備份和恢複也是必要的,保障用(yòng)戶的數據萬無一失;除此之外,稀釋計算器和傳代計算器會讓您的實驗變得更加簡單。


    性價比--硬件配置高,軟件分(fēn)析功能(néng)強大,技(jì )術參數優秀的計數儀往往相比于低配置的參數價格高一些,但不能(néng)一味追求低價,讓數據準确性和精(jīng)确性沒了保障,甚至反而影響我們的實驗進度,最後可(kě)能(néng)面臨重新(xīn)選擇。所有(yǒu)小(xiǎo)薇經常在一些用(yòng)戶細胞房會發現在吃灰的低端計數儀,面對這些價格低的儀器選擇要慎重!


    服務(wù)--這裏包括售前售後服務(wù)、試用(yòng)培訓、技(jì )術支持,3Q驗證服務(wù),以及儀器的質(zhì)保期。萌薇計數儀年質(zhì)保,買的放心,用(yòng)的安(ān)心,并在全國(guó)主要中(zhōng)心城市有(yǒu)專業的技(jì )術支持,随時響應。


    聽了以上的分(fēn)析,我想大家對選擇一款合适的計數儀有(yǒu)一定的心得,不管你是想選擇一體(tǐ)機還是分(fēn)體(tǐ)機,明場還是熒光,樣品是常規培養的細胞還是粒徑小(xiǎo)的微生物(wù)樣本,又(yòu)或者想選一個高性價比且服務(wù)有(yǒu)保障的機器,那麽這邊有(yǒu)幾款産(chǎn)品想介紹給大家,總有(yǒu)一款能(néng)滿足您的需求。 

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    計數儀産(chǎn)品介紹

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      SmartCell 200 Plus


     明場分(fēn)體(tǐ)機(連電(diàn)腦)

     非台盼藍細胞計數

     台盼藍染色活率分(fēn)析

     人工(gōng)智能(néng)算法

     630萬像素高清成像

     6樣品孔通量

     8秒(miǎo)檢測分(fēn)析

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    明場一體(tǐ)機

    非台盼藍細胞計數

    台盼藍染色活率分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    8秒(miǎo)檢測分(fēn)析

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            SmartCell 600

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           SmartCell 800

    明場+雙熒光一體(tǐ)機

    AO/PI熒光分(fēn)析

    非台盼藍細胞計數

    台盼藍活率分(fēn)析

    GFP/RFP轉染分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

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           SmartCell 880

    明場+四熒光一體(tǐ)機

    AO/PI/DAPI/CY5熒光分(fēn)析

    非台盼藍細胞計數

    台盼藍活率分(fēn)析

    GFP/RFP轉染分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

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    明場一體(tǐ)機

    酵母、小(xiǎo)球藻、菌種計數

    寄生蟲卵囊計數

    血小(xiǎo)闆、免疫細胞計數

    台盼藍染色活率分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    20倍光學(xué)放大

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       SmartCell 900 BF    

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          SmartCell 900 FL

    明場+雙熒光一體(tǐ)機

    酵母、小(xiǎo)球藻、菌種計數

    血小(xiǎo)闆、免疫細胞計數

    雙熒光活率分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    20倍光學(xué)放大

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    明場+雙熒光一體(tǐ)機

    AO/PI熒光分(fēn)析

    台盼藍染色分(fēn)析

    非台盼藍細胞計數

    GFP/RFP轉染分(fēn)析

    人工(gōng)智能(néng)算法

    1200萬像素高清成像

    6樣品孔通量


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        Find C     

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    總結

    當大家想擁有(yǒu)一台合适的計數儀時,首先從自身測試的細胞樣本出發,選擇相對應原理(lǐ)的儀器,再參考其核心技(jì )術參數,尤其是成像系統和算法,同時還要考慮儀器檢測數據的可(kě)靠性和檢測效率,當然,服務(wù)質(zhì)量和質(zhì)保也不能(néng)忽視。


    萌薇細胞計數儀不僅能(néng)夠滿足多(duō)領域、多(duō)應用(yòng)場景的計數分(fēn)析,可(kě)以對細胞濃度、活率等細胞參數進行準确檢測;為(wèi)客戶提供符合FDA21 CFR Part 11要求的安(ān)全用(yòng)戶登錄系統、多(duō)級用(yòng)戶管理(lǐ)權限及審計追蹤,還可(kě)以為(wèi)客戶提供3Q驗證服務(wù)和方法學(xué)驗證,同時軟件可(kě)通過CSV認證(計算機化系統認證),支持數據的備份與恢複;儀器具(jù)備CE認證(安(ān)全合格标志(zhì))和VHP(汽化過氧化氫)滅菌。這些都将為(wèi)您的細胞檢測方法建立放心、可(kě)靠的計數标準。


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