Nanophotometer®可(kě)以測量的樣品種類，是用(yòng)戶關心的問題。特别是經常測量的核酸類樣品，我們一般用(yòng)dsDNA的濃度作(zuò)為(wèi)示例，以展示設備的濃度測量範圍，而您可(kě)能(néng)會問，RNA可(kě)以測量嗎？引物(wù)可(kě)以測量嗎？短序列能(néng)測嗎？DNA納米材料能(néng)測嗎？

超微量分(fēn)管光度計并不直接測量濃度，而是通過光學(xué)檢測器測量樣品的吸光值，根據朗伯-比爾定律計算濃度的。因此，符合該定律的所有(yǒu)樣品均可(kě)以被測量。以NP80機型為(wèi)例，檢測器的檢測範圍為(wèi)0.02A-330A（已換算為(wèi)10mm下吸光值），波長(cháng)範圍為(wèi)200-900nm，那麽原則上樣品的吸光值和吸收波長(cháng)隻要落在這個範圍内，都可(kě)以被測量，可(kě)獲得定量或相對定量的濃度值和其他(tā)信息。

核酸中(zhōng)的嘌呤和嘧啶堿基有(yǒu)共轭雙鍵，具(jù)有(yǒu)吸收紫外光的性質(zhì)，其至大吸收波長(cháng)在250nm-270nm之間。堿基與戊糖、磷酸形成核苷酸後，其至大吸收峰不會改變，至大吸收波長(cháng)約在260nm，吸收低峰在230nm。目前通行的标準，在波長(cháng)260nm處，1單位OD值的光密度相當于雙鏈DNA（dsDNA）濃度為(wèi)50ng/μl、單鏈DNA（ssDNA）濃度為(wèi)37ng/μl、RNA濃度為(wèi)40ng/μl、單鏈寡核苷酸為(wèi)33ng/μl（常規值）。

也就是說，設備測量的吸光值，乘以這些系數（1/ε），就可(kě)以得到對應樣品的濃度值。任何種類的核酸樣品都是可(kě)以測量的，關鍵是在軟件中(zhōng)正确選擇樣品種類。Nanophotometer®測量界面可(kě)選擇多(duō)種核酸樣品類型，在報告中(zhōng)也會有(yǒu)對應的方法學(xué)及消光系數顯示。也可(kě)以輸入核苷酸的序列來确定樣品具(jù)體(tǐ)的消光系數（可(kě)支持70萬個以上堿基序列，但通常用(yòng)于寡核苷酸具(jù)體(tǐ)消光系數的确認）。

如果錯誤地選擇了樣品類型，但已完成了測量，也有(yǒu)兩種方法可(kě)以補救：

方法一：不擡起樣品蓋，重新(xīn)選擇正确的樣品類型，再次測量。Implen的樣品壓縮法支持這種操作(zuò)，而液柱拉伸法不建議一滴樣品的多(duō)次測量。

方法二：在結果中(zhōng)查看吸光值數據，手動乘以消光系數，計算濃度。

例如：測量RNA樣品時，選擇了dsDNA樣品，測得濃度為(wèi)200ng/μl，則樣品實際濃度應為(wèi)160ng/μl（200/50×40ng/μl）（暫不考慮很(hěn)小(xiǎo)的背景校正）。

對于蛋白質(zhì)應用(yòng)，原理(lǐ)相同，根據0.02-330A的吸光值檢測範圍，結合蛋白質(zhì)的消光系數ε，可(kě)确定任意蛋白質(zhì)樣品的濃度檢測範圍。如BSA（消光系數0.667）檢測範圍為(wèi)0.03-478mg/ml，則某消光系數為(wèi)1.33的單抗樣品檢測範圍即為(wèi)0.015-239mg/ml。實際的線(xiàn)性範圍需要根據樣品情況具(jù)體(tǐ)測試。 

Nanophotmeter®基于紫外-可(kě)見吸收光譜的測量，不但可(kě)以勝任各種核酸和蛋白質(zhì)的定量，還具(jù)備全光譜測量的優異性能(néng)，Implen在分(fēn)析化學(xué)領域也具(jù)有(yǒu)廣泛的應用(yòng)。樣品壓縮法的一大特點就是良好的樣品兼容性，推出的4096陣列CMOS檢測器也使測量的可(kě)靠性進一步提高。對于多(duō)樣化的樣本測量，Implen可(kě)以充分(fēn)滿足用(yòng)戶的期望。

轉載：江西立康公(gōng)衆号 鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/rFeCiftwwKivc3_HSeq9ig