Nanophotometer®可以測量的樣品種類，是用戶關心的問題。特别是經常測量的核酸類樣品，我(wǒ)們一(yī)般用dsDNA的濃度作爲示例，以展示設備的濃度測量範圍，而您可能會問，RNA可以測量嗎(ma)？引物(wù)可以測量嗎(ma)？短序列能測嗎(ma)？DNA納米材料能測嗎(ma)？

超微量分(fēn)管光度計并不直接測量濃度，而是通過光學檢測器測量樣品的吸光值，根據朗伯-比爾定律計算濃度的。因此，符合該定律的所有樣品均可以被測量。以NP80機型爲例，檢測器的檢測範圍爲0.02A-330A（已換算爲10mm下(xià)吸光值），波長範圍爲200-900nm，那麽原則上樣品的吸光值和吸收波長隻要落在這個範圍内，都可以被測量，可獲得定量或相對定量的濃度值和其他信息。

核酸中(zhōng)的嘌呤和嘧啶堿基有共轭雙鍵，具有吸收紫外(wài)光的性質，其至大(dà)吸收波長在250nm-270nm之間。堿基與戊糖、磷酸形成核苷酸後，其至大(dà)吸收峰不會改變，至大(dà)吸收波長約在260nm，吸收低峰在230nm。目前通行的标準，在波長260nm處，1單位OD值的光密度相當于雙鏈DNA（dsDNA）濃度爲50ng/μl、單鏈DNA（ssDNA）濃度爲37ng/μl、RNA濃度爲40ng/μl、單鏈寡核苷酸爲33ng/μl（常規值）。

也就是說，設備測量的吸光值，乘以這些系數（1/ε），就可以得到對應樣品的濃度值。任何種類的核酸樣品都是可以測量的，關鍵是在軟件中(zhōng)正确選擇樣品種類。Nanophotometer®測量界面可選擇多種核酸樣品類型，在報告中(zhōng)也會有對應的方法學及消光系數顯示。也可以輸入核苷酸的序列來确定樣品具體(tǐ)的消光系數（可支持70萬個以上堿基序列，但通常用于寡核苷酸具體(tǐ)消光系數的确認）。

如果錯誤地選擇了樣品類型，但已完成了測量，也有兩種方法可以補救：

方法一(yī)：不擡起樣品蓋，重新選擇正确的樣品類型，再次測量。Implen的樣品壓縮法支持這種操作，而液柱拉伸法不建議一(yī)滴樣品的多次測量。

方法二：在結果中(zhōng)查看吸光值數據，手動乘以消光系數，計算濃度。

例如：測量RNA樣品時，選擇了dsDNA樣品，測得濃度爲200ng/μl，則樣品實際濃度應爲160ng/μl（200/50×40ng/μl）（暫不考慮很小(xiǎo)的背景校正）。

對于蛋白(bái)質應用，原理相同，根據0.02-330A的吸光值檢測範圍，結合蛋白(bái)質的消光系數ε，可确定任意蛋白(bái)質樣品的濃度檢測範圍。如BSA（消光系數0.667）檢測範圍爲0.03-478mg/ml，則某消光系數爲1.33的單抗樣品檢測範圍即爲0.015-239mg/ml。實際的線性範圍需要根據樣品情況具體(tǐ)測試。 

Nanophotmeter®基于紫外(wài)-可見吸收光譜的測量，不但可以勝任各種核酸和蛋白(bái)質的定量，還具備全光譜測量的優異性能，Implen在分(fēn)析化學領域也具有廣泛的應用。樣品壓縮法的一(yī)大(dà)特點就是良好的樣品兼容性，推出的4096陣列CMOS檢測器也使測量的可靠性進一(yī)步提高。對于多樣化的樣本測量，Implen可以充分(fēn)滿足用戶的期望。

轉載：江西立康公衆号 鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/rFeCiftwwKivc3_HSeq9ig